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N-糖基化修饰组
N-糖基化(N-Glycosylation)是最重要的蛋白质翻译后修饰之一,主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用,参与细胞与细胞的连接、受体配体的相互作用、免疫应答、细胞凋亡及各种发病机理等生物学过程。拜谱生物N-糖基化蛋白质修饰组,利用凝集素富集N-糖基化肽段,高通量,高分辨,可分析不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路,以及候选糖蛋白标志物的筛选等。
N-糖基化修饰组
原理/实验流程
糖量子本身的僵化性和成千上万N-glycoproteins低抒发技术可使得对N-glycosylation框架的定量分析的描叙相当有难度。在判断低丰度的N糖基化绘制蛋清或肽段时,这其中夹杂着大批量未绘制的蛋清肽断,这很轻松将低丰度的糖基化绘制蛋清肽段的网络信号改变。凝素亲和法是现阶段糖蛋清质组学中操作比较多泛的分割生物富集技术。凝集素(lectin)是一种类糖整合蛋清质,能专情区分某些个性化框架的单糖或聚糖中其他的糖基队列而与之整合,他们与糖链可逆性非共价整合,糖蛋清或糖肽被凝集素猎取后会,一般 用其他的单糖经过之间的竞争整合凝集素将糖蛋清或糖肽冲洗掉下来了。 淀粉酶质根据酶解后用凝集素(lectin)生物富集N-糖基化肽段,随后用N-糖酰胺酶(PNGase)在H218O中割除联接在天冬酰胺残基(Asn)上的糖链。该解决使得Asn原子量提升2.9890Da。结尾用高可靠性强,精密度LC-MS质谱仪测试脱糖后的肽段,在搜索数剧库,核定脱糖后原子量和她理论体系原子量的变化无常并且糖基化掩盖肽段的回文序列,若想选定该淀粉酶质的N-糖基化位点。N-糖基化位点选定然后,再用label-free的机制对其做出定量研究分析研究分析。

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产品特色
  • 01大规模的蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析

  • 02采用凝集素特异性富集N-糖基化肽段
  • 03高通量,高分辨

应用方向
  • 01
    不同实验条件下糖基化蛋白质组变化及信号通路分析

  • 02
    筛选候选糖蛋白标志物


送样建议
样本类型 常规送样量
植物叶片 湿重≥3g
植物根茎、木质部、韧皮部等 湿重≥5g
细胞样品 细胞量湿重≥5*10^7
组织样品 人、动物、微生物湿重≥50mg
体液样品 血清、血浆体积≥200μl,脑脊液≥500μl,尿液≥1000μl
参考文献
1、Zielinska DF, Gnad F, Schropp K, Wi?niewski JR, Mann M. Mapping N-glycosylation sites across seven evolutionarily distant species reveals a divergent substrate proteome despite a common core machinery. Mol Cell. 2012;46(4):542-548. doi:10.1016/j.molcel.2012.04.031
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